描述:大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒操作簡(jiǎn)單、結(jié)果精確,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可。我司也一直和國(guó)內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏。
一、大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒詳細(xì)介紹
中文名稱:大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠ELISA試劑盒
檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月
檢測(cè)樣本種類:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá)。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的大鼠γ干擾素(IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加大鼠γ干擾素(IFN-γ),再與HRP 標(biāo)記的γ干擾素(IFN-γ)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素(IFN-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠γ干擾素(IFN-γ)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
四、操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
五、試劑盒計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實(shí)際濃度。
六、注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
七.特別提醒
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
八.更多優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品
ZK-03023 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
ZK-03024 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
ZK-03025 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒
ZK-03026 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
ZK-03027 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
ZK-03028 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
ZK-03029 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
ZK-03030 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
ZK-03031 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
ZK-03032 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
ZK-03033 小鼠γ干擾素(IFN-γ)(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
ZK-03034 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
ZK-03035 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
ZK-03036 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
ZK-03037 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
ZK-03038 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
ZK-03039 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
ZK-03040 小鼠磷脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒
ZK-03041 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒
ZK-03042 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒
ZK-03043 小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒
ZK-03044 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
ZK-03045 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
ZK-03046 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒
ZK-03047 小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒
ZK-03048 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒
ZK-03049 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒
ZK-03050 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒
ZK-03051 小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒